African swine fever pcr detection instrument using steps

非洲豬瘟pcr檢測儀器使用步驟

樣品采集及運輸

樣品采集及運輸按照NY/T541的規定執行，采集豬的脾臟、淋巴結、血液等組織材料或血粉用于檢測，樣品應在冷藏條件下盡快運輸至實(shí)驗室，避免反復凍融。采樣時(shí)應穿戴個(gè)人生物安全防護裝備，實(shí)施現場(chǎng)消毒和廢棄物處理。

樣品處理

檢測前樣品應在*中處理。取0.1g～0.2g組織或血粉，經(jīng)研磨破碎后加1mL的0.01mol/L PBS（pH7.2）制成勻漿，經(jīng)12 000 r/min離心2Min取上清；全血、血清樣品直接取1mL，置于1.5 mL離心管內蓋緊管帽。將上述處理的樣品置于60℃條件下滅活30min。

樣品保存

采集或處理好的樣品在2℃～8℃條件下保存應不超過(guò)24 h；如需保存，應放置-70℃冰箱，但應避免反復凍融（凍融不超過(guò)3次）。

病毒DNA提取

DNA提取應在樣本制備區內采用以下方法進(jìn)行，若使用其他等效的病毒DNA提取試劑，則按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。

待檢樣品、陽(yáng)性對照和陰性對照的份數總和用n表示，取n個(gè)滅菌1.5 mL離心管，逐管編號。

每管加入200μL DNA提取液1，然后分別加入待測樣品、陰性對照和陽(yáng)性對照各200μL，1份樣品換用1個(gè)吸頭，混勻器上震蕩混勻5s。于4℃～25℃條件下，13 000 r/min離心10 min。DNA提取液1見(jiàn)附錄A。

盡可能吸取上清、棄去，吸頭不要碰到沉淀，再加入10μL DNA提取液2，混勻器上震蕩混勻5 s。于4℃～25℃條件下，2 000 r/min離心10s。DNA提取液2見(jiàn)附錄A。

100℃干浴或沸水浴10 min。

加入90μL無(wú)DNA酶的滅菌去離子水，13 000 r/min離心10 min，上清即為提取的DNA，-20℃保存備用。無(wú)DNA酶的滅菌去離子水見(jiàn)附錄A。

非洲豬瘟pcr檢測儀器使用步驟

　　儀器特點(diǎn)

　　1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿(mǎn)足外出實(shí)驗的需求。

　　2.內置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡(jiǎn)便快捷。

　　3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片，結合德國PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補償邊緣的溫度控制模式，大升溫速度7℃，大降溫速度5℃，大大縮短實(shí)驗時(shí)間。

　　4.整板3s快速采光模式，保證實(shí)驗結果孔位一致性。

　　5.簡(jiǎn)潔直觀(guān)的軟件引導，輕松開(kāi)啟檢測實(shí)驗。

　　非洲豬瘟PCR檢測儀應用領(lǐng)域

　　□ 基礎科學(xué)研究

　　□ 病原體檢測

　　□ 肉制品摻假

　　□ 轉基因檢測

　　□ 食品安全檢測

　　□ 藥物開(kāi)發(fā)及合理用藥

　　□ 基因表達

　　□ 水體監測

　　技術(shù)參數

　　樣品容量：16x0.2ml、支持8聯(lián)管

　　適用耗材：常見(jiàn)透明PCR 耗材，8x0.2ml 排管，0.2ml 單管

　　反應體系：5-120ul反應模式體系

　　加熱/制冷模塊：進(jìn)口半導體熱電模塊

　　溫度控制范圍：4°C-99℃

　　升降溫平均速率≥2°C/秒

　　溫控精度：≤±0.1°C

　　溫度均勻性：≤± 0.2°C

　　溫控區域數量：多點(diǎn)(2 點(diǎn))

　　梯度數：0 個(gè)

　　梯度溫度范圍：無(wú)

　　梯度孔數：無(wú)

　　激發(fā)光源：免維護led

　　激發(fā)光波長(cháng)范圍：400-700nm

　　檢測部件：進(jìn)口光電檢測器

　　檢測通道數：標配 1通道(FAM)、高配(選配)(FAM、VIC)

　　適用染料和探針：FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3(選配), ROX/Texas Red(選配), Cy5,TAMARA(選配)

　　軟件功能：熒光定量 PCR 系統軟件;

　　實(shí)時(shí)擴增反應曲線(xiàn)功能;

　　特定標本實(shí)時(shí)反應曲線(xiàn)顯示;

　　數據分析功能;

　　陰陽(yáng)結果自動(dòng)判定功能;

　　圖形化顯示功能。